人生就是博-尊龙凯时 四环素类检测试剂盒（酶联免疫法）使用说明书

1. 原理及用途

本试剂盒利用间接竞争ELISA方法检测组织、蜂蜜、鸡蛋等样本中的四环素类药物（Tetracyclines，TCs）。试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测过程中，加入标准品或样品溶液，样本中的四环素类药物与酶标板上预包被的偶联抗原竞争抗体，进一步加入酶标记物后，用TMB底物显色。样本的吸光度值与其四环素类药物含量呈负相关，结合标准曲线得出样本中药物的残留量。

2. 技术指标

2.1 灵敏度

试剂盒灵敏度：0.05 ppb (ng/ml)

2.2 反应模式

37℃，30分钟 × 2，15分钟

2.3 检测下限

• 组织、肝脏、鸡蛋: 2 ppb
• 蜂蜜: 2 ppb
• 尿样: 0.5 ppb
• 牛奶: 2 ppb
• 奶粉: 4 ppb

2.4 交叉反应率

• 四环素: 100%
• 强力霉素: 70%
• 金霉素: 10%
• 土霉素: 10%

2.5 样本回收率

• 组织: 85 ± 20%
• 肝脏、鸡蛋: 75 ± 20%
• 蜂蜜: 85 ± 20%
• 尿样: 80 ± 20%
• 牛奶、奶粉: 75 ± 20%

3. 试剂盒组成

• 酶标板: 96 孔
• 高浓度标准品溶液 1瓶: 100 ppb (1 ml/瓶，注意密封)
• 标准品溶液: 0 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、0.2 ppb、0.4 ppb、0.8 ppb (均为空瓶，现配现用)
• 酶标记物（红盖）: 11 ml
• 抗体工作液（蓝盖）: 55 ml
• 底物液A（白盖）: 6 ml
• 底物液B（黑盖）: 6 ml
• 终止液（黄盖）: 6 ml
• 20×浓缩洗涤液（白盖）: 40 ml
• 5×复溶液（黄盖）: 50 ml
• 说明书: 1份
• 盖板膜: 1张
• 自封袋: 1个

4. 所需器材和试剂

4.1 仪器

包括酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01 g）。

4.2 微量移液器

单道20µl-200µl，100µl-1000µl，多道300µl

4.3 所需试剂

浓盐酸、无水甲醇。

5. 样本前处理

5.1 样本处理前须知

实验器具必须洁净，务必使用一次性吸头以避免污染。

5.2 配液

配液1：复溶液需用去离子水稀释5倍。配液2：工作洗涤液需稀释20倍。配液3：样本提取液使用浓盐酸与去离子水混合，再加入无水甲醇。

5.3 样本处理步骤

详细处理步骤见对应样本类型，确保严格按照标准操作流程进行。

6. 酶联免疫试验步骤

需将试剂从4℃冷藏取出，置于室温平衡30分钟以上，并进行必要的搅拌与稀释。交替加样与洗涤步骤，确保显色反应完成以及记录结果。

7. 结果分析

通过标准液的吸光率计算，绘制标准曲线并进行浓度计算。建议使用专业分析软件提高效率和准确性。

8. 注意事项

遵循操作规范，避免试剂过期，及时处理潜在的腐蚀性化学品。

9. 贮藏及保存期

本试剂盒应储存在2-8℃，避免冷冻，保质期为1年，生产日期详见包装盒。